Калицивироз –   инфекционное  заболевание  кошек,  распространенное во всем мире. Возбудитель - Feline calicivirus (FCV), РНК-содержащий вирус, относящийся к  семейству Caliciviridae, обладает высокой пластичностью генома, что позволяет ему быстро реагировать на различные экологические изменения. Способность  вируса  к мутационной  изменчивости  объясняет  клиническое разнообразие  болезни  у  домашних  питомцев: от субклинической формы с бессимптомным течением,  поражений слизистой ротовой полости и глаз, а также  -  верхних отделов органов дыхания разной тяжести (Рис. 1-2) до системной инфекции, часто заканчивающейся гибелью животного. Вирус поражает в некоторых случаях до 91% восприимчивых животных.

Рисунок 1 – Некроз  языка, обусловленный  FCV

Установлено  широкое  распространение FCV  у  домашних  кошек  в  г. Новосибирске.  Геном вируса   выявлен методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) у 31,7% обследованных животных.

Рисунок 2  – Серозный ринит и конъюнктивит, обусловленные FCV

Эффективность специфической профилактики калицивироза зависит от наличия  вирусного  антигена  с  высокой  инфекционной  и  иммуногенной  активностью.

Цель исследования – получить антиген FCV с высокой инфекционной активностью, а также сравнить эффективность использования для этих целей культурального пластика двух производителей (один из которых TPP).

   Вирус  изолировали  из  проб  конъюнктивальных,  носовых  истечений, которые  гомогенизировали, разводили 1:10 питательной средой Игла МЕМ, центрифугировали,  а  надосадочную  жидкость фильтровали  через  фильтры диаметром 0,22 -µm. Полученные суспензии исследовали методом ПЦР.  Положительные пробы использовали для выделения вируса. Для этого их в объеме 0,1 мл вносили в монослой культуры клеток во флаконах (25 см3).  
   В результате получили  изолят FCV «Эшли». Цитопатическое действие вируса в культуре клеток FK-81 (рис.3) проявлялось через 6-10 часов после заражения  округлением  значительного  количества  клеток,  постепенной  их дегенерацией и отделением от стекла с образованием пустот (рис.4). Инфекционную активность вируса определяли микрометодом в 96-луночных культуральных планшетах. Титр вируса составил 8,33±lg ТЦД 50/0,1см3.

Рисунок 3 –  цитопатическое действие, вызванное размножением вируса калицивироза (изолят Эшли) в культуре клеток  FK-81, через 24 часа после инфицирования. Увеличение 1000х

Рисунок 4 –   перевиваемая культура клеток почки котенка F-81, неинфицированная. Увеличение 1000х

В  результате  исследований  получено  два  изолята FCV  с  высокой  инфекционной  активностью,  которые  могут  быть  использованы  для  создания высоко эффективных диагностических и профилактических препаратов.
   Проведение  эксперимента  параллельно  с  использованием  пластика двух производителей (один из которых TPP, Швейцария) позволило выявить его высокое качество (прикрепление и размножение культур клеток, хороший рост и быстрое формирование монослоя), возможность использования при проведении экспериментальных вирусологических исследований.  
   Яркий желтый окрас крышек культуральных флаконов (TPP)  вносит большую порцию оптимизма в проведение экспериментов! Особенно это актуально  в  условиях  суровой  сибирской  зимы  и  при  выполнении  больших объемов  монотонных  скрининговых  диагностических  серологических исследований! Удобный дизайн культуральных планшетов облегчает выполнение работы!